Для выполнения работы нам потребовались компоненты из набора «Охотник за микробами»:
- Предметные стекла – стекла для микроскопического исследования;
- Перманентный маркер;
- Пипетка Пастера на 1 мл;
- Зубочистки – инструмент для отбора пробы;
- Судан черный – краситель;
- Пинцет – вспомогательный инструмент для фиксации образцов;
- Изопропанол – реагент для промывки образцов.
Также нам потребовалась спиртовка (зажигалка)
Ход работы:
- На предметном стекле перманентным маркером нарисовали несколько кругов (количество кругов должно быть равно количеству колоний, которые вы собираетесь исследовать), круги пронумеровали.
- Перевернули стекло и дальнейшую работу проводили на обратной стороне стекла (сторона, на которой нарисованы круги должна оказаться внешней);
- C помощью пипетки Пастера на 1 мл поместили каплю воды (~20-30 мкл) в центр каждого круга;
- Чистой зубочисткой коснулись культуры азотобактера, чтобы зацепить небольшое количество биомассы;
- Разболтали колонию в воде, стараясь при этом, чтобы разные капли воды не перемешивались между собой;
- Капли подсушили на воздухе до полного исчезновения влаги;
- Зафиксировали препарат с помощью пламени. Для этого взяли предметное стекло пинцетом и несколько раз провели внешней поверхностью стекла (обратной от нанесенного образца) по пламени зажигалки или спиртовки.
- Дождались, пока стекло остынет и на каждую высохший образец бактерий (пятно) нанесли каплю красителя – судана черного;
- Оставили стекло на 15 минут при комнатной температуре;
- Промыли пятна изопропанолом, направляя струю из капельницы на пятна;
- Проанализировали интенсивность окраски пятен. Если после промывки стекла бактерии окрасились в голубой цвет, значит они способны активно накапливать полимеров в своих клетках.
- Высушили стекло и рассмотрели бактерии через объектив микроскопа при максимальном увеличении.
1. Огород - участок почвы из-под свёклы при увеличении 40Х;
2.Огород - участок почвы из-под тыквы при увеличении 40Х;
3. Огород - участок почвы из-под помидор при увеличении 40Х;
4. Почва из участка сенокосного поля при увеличении 40Х;
5. Почва из участка пастбища при увеличении 40Х.
Нами было исследовано 5 образцов почв (свёкла, тыква, помидор, сенокосное поле, пастбище) на способности бактерий к полимерным соединениям. В результате можно сделать вывод, что бактерии во всех образцах имеют способность к накоплению полимерных соединений.
Аккумуляция полимеров внутри клеток бактерий может иметь различные механизмы и функции. Например, бактерии могут использовать полимеры для накопления энергии, защиты клеток или резервирования питательных веществ. Благодаря таким исследованиям мы можем лучше понять микробные сообщества в почве и их роль в экосистеме.